梦他失她
超氧化物歧化酶(SOD) 超滤法生产新工艺 前言 SOD的中文名称是超氧化物歧化酶,其英文名为Superoxidedimutase,分子量(牛血红细胞) 约 32000 是广泛存在生物体内的金属蛋白醇 , 别名有 : orgotein,ormetein,ontosein; ;Palosein等,SOD被科学家誉为21世纪最有发展前途的药用酶。 一、本工艺是从红细胞,肝和其它哺乳动物组织分离而得的金属酶;含两个亚基,每个亚基各含一个铜原子和一个锌原子,SOD可催化O2,歧化为H2O和O2, 其性质不仅仅取决于酶蛋白,而且还取决于活性部位的金属离子,按金属离子类型不同, 可分为和Fe--SOD,Mn--SOD三种.在一般条件下,SOD较稳定. 不同来源的 ,其紫外吸收光谱略有差异,如牛血SOD在258nm处显示最大吸收,而猪血SOD的最大吸收峰为265nm,在特定条件下,酶的活性可下降,甚至完全丧失, 如氰化物可抑制SOD活性,双氧水使SOD活性下降,氯化胍能明显抑制SOD活性等。 二、SOD用途主要是基于SOD是超氧阴离子清除剂,超氧阴离子(O2~)是人体内有毒物质,它能引起多种疾病,故能清除炎症过程中伴同产生的超氧离子, 而显示出强大的抗炎作用。 在医药工业:SOD可以治疗由于超氧离子引起的各种疾病,如糖尿病,白内障, 风湿性关节炎等,也是消炎的有效药物,而且还能抗衰老,抗肿瘤,抗辐射, 抗自身免疫疾病,现代研究表明:SOD还能治高血压,冠心病,胆囊炎,肺气肿等难治之症. 日用化学工业:由于SOD有防止细胞老化和解毒等功效, 因此在化妆品和护肤剂等工业产品中,添加SOD之后,具有防晒,祛斑,使皮肤柔嫩的作用.是目前化妆品行业中不可缺少的一种添加剂,国内及同行都已出现大量产品.食品工业:在食品添加剂加 SOD之后,增强营养,解除毒性,延长体内细胞寿命,国内已有SOD营养液产品, 并通过上海科研单位有关专家的鉴定。 三、SOD的开发前景:目前SOD在全国仅有少数科研单位及生化制药厂研究和开发本产品,而使用SOD产品厂家却日益增多,远不能满足市场需求 . 为鼓励和大力开发SOD新产品,国家已将其列入重点科技开发项目,并投放大批经费,现已获得成功, 开始向企业化生产转移,市场前景十分广阔。 四、注意事项:(1)我中心热忱欢迎社会各界朋友现场学习,由生化工程师向您授课,通过现场操作,指导,培训,使您尽快掌握该技术。(2)本工艺, 技术资料等不经我公司同意,不得擅自转让,翻印,销售给任何单位和个人,违者法律追究。 新法提炼技术 一、主要设备:(1)工业用离心机一台;(2)恒温水浴锅(10L--50L)(可自制)1台;(3)冰柜1台;(4)搅拌机1台;(5)玻璃器皿:1000ml,500ml烧杯各3只,50ml烧杯 2 只,50ml,500ml量杯各1个;(6)塑料桶若干个。 二、主要试剂:(工业纯度)柠檬酸钠,柠檬酸,葡萄糖,乙醇90%,氯仿,丙酮,氯化钠,磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,去离子水或蒸馏水,葡萄糖凝酸胶SephadexG-- 100 和DEAE--纤维素. 三、试剂的配制: 1.抗凝剂配方:(1)柠檬酸钠30g,柠檬酸10g葡萄糖 25g加水至1升,一般此种是每7ml血液,加1ml(抗凝剂).(2)40g升柠檬酸钠溶液:在1升水中加入克的氯化钠。 2.生理盐水:()在91克水中加入克的氯化钠。 3.磷酸盐缓冲溶液的配制:,磷酸盐缓冲溶液,一般用,35. 61 克升和 克升,前者加,后者加混合后即为PH= 缓冲溶液,如果用为升,为克升,仍是前者,后者混合后即得。 4.冷却剂:在本工艺中有使用-15度低温,一般用如下配方:用33克食盐加入100克雪或碎冰,以此比例配成混合体可达度。 四、工艺流程 (一)除血红蛋白 1.血液抗凝处理,在新鲜牛、马、猪血中迅速加入ACD1号抗凝剂,并缓慢搅匀,每7毫升血液中加入抗凝剂1毫升或2号抗凝剂。 2.把抗凝处理的血液放入离心机,以3000rmin离心约15--20分钟, 用吸管把上清液(黄色血清)小心吸去抛掉,下层的红血球用2--3倍生理盐水洗2--3次,在每一次洗涤中,用离心机以3000rmin离心,7--8分钟,反复操作后,得到洗涤血红细胞,洗涤后的血红细胞在-15度下冷冻可保存半年并不影响产率和比活,在血液量大, 处理不完时必须这样做。 3.在洗净的红血球中加入等体积去离子水,剧烈搅拌30分钟,使红血球细胞壁砍碎,以使其内的SOD浸出.最好在0--4度静止过夜后,把溶血进行有机提取。 4.接着向溶血中缓缓加入倍体积的预冷(-15度)95%乙醇和倍预冷氯仿,搅拌10--15分钟后,原溶血呈浆糊状,静止1--2小时,用滤布除去凝固的血红蛋白,然后将滤液2500rmin离心约1--5分钟留上清液抛去沉淀, 此时如果上清液略为微黄色时,可用快速过滤纸过滤,可得到微带蓝色的清澈透明的粗酶液。 (二)粗酶液的初步提纯: 1.丙酮提醇:向酶液中加倍量预冷(-15度 ) 丙酮 , 生成大量白色沉淀 , 以3000rmin离心2分钟收集沉淀,上清液可不必吸取,直接倾倒。 2.热变性:(除杂蛋白)准备好衡温浴锅,在本工艺中,提前30分钟, 注满水接通电源后,使之加热到55--60度以省时间,将沉淀量约50倍量体积比加入磷酸钠缓冲溶液,水浴加热至60度,15分钟后迅速冷却到室温.3000rmin离心2 分钟得上清液,在上清液中,缓缓滴加倍体积的预冷(-15度)丙酮,生成白色沉淀。 3.初纯SOD:在上述沉淀中加去离子水,制成20--30%SOD溶液,分装入样品瓶中,放入冷冻干燥机中,于开机后以真空度,约小时, 得到化妆或食品用SOD,该产品比活大于3000umg,外观呈微带蓝色的白色冻干品。 (三)SOD进一步提纯: SOD精品一般是把SOD产品经过柱层析,柱层析后的SOD没有小分子等杂质, 层析后为高活性的SOD大分子.SOD精品价格更高,它主要作为生物化学试剂, 化验室标准试剂试用.目前SOD柱层析有两种,二者可单独使用,也可结合使用,一般是DEAE-- 纤维素层析和SephadcxG--100葡聚糖凝胶层析,将(二)2,热变性后SOD丙酮沉淀用,缓冲溶液溶解,有不溶的杂蛋白时.离心抛去沉淀,上清液上DEAE--纤维素或SephadsxG--100层析柱(1*20cm或*30cm),梯度洗脱 , 洗脱液为,,NaH2PO4--NaHPO4缓冲液,下流速度控制在,在分光光度计上用紫外谱325nm处测流出液,合并活力峰,再用蒸馏水反复透析,透析彻底后, 放入样品皿置于冷冻干燥机中干燥后即得SOD精品。 五、注意事项: 1.掌握适当的温度和时间:虽然SOD对热较稳定, 但在分离纯化过程中最好还是采用较低温度,一般以0--10度为宜,时间长不要超过3天。 2.注意提取,提纯方法:使用有机溶剂或者加热均能有效沉淀蛋白质, 但掌握适当溶剂和加热结合的办法可以达到最佳效果。 六、SOD的检测方法:活性检验,比较方便的办法是用连笨三酚自氧化法, 先测得连笨三酚的自氧化速率,然后加入SOD再测得加入SOD之后的氧化速率,按照酶活性单位定义,即在最佳条件下,每分钟抑制连笨三酚自氧化分解速率达50% 的酶量定义为一个酶单位.依次求出活力总值 ,同时也可以用聚丙烯酰胺凝胶电泳来测定其纯度,看其分子量32000左右的一条带是否与有关文献指导一致. 超氧化物岐化酶(superoxide dimutase 简称SOD)是一种重要的氧自由基清除剂,作为一种药用酶,引起国内外生化届和医药届的极大关注。SOD应用于医学临床上可以治疗多种疾病,类风湿性关节炎、心肌梗塞等,在防辐射,抗衰老,抗肿瘤等方面也有积极的作用,而且广泛用于化妆品和食品添加剂的行列。 自1969年Mccord和Fridovich 首次发现从牛血细胞中发现超氧化物岐化以来,到目前为止,国内已有几十家科研单位对SOD作了大量的研究和试产工作,而且有些已批量生产。SOD引起了国内生化界的重视,1988年在浙江宁波如开了《全国首届SOD学术会议》。1989年4月在河南开封《第三届药用酶学术会议》上,SOD被列为重点开发项目,90年7月在大连《全国第二届SOD学术会议》,SOD已作为一种药用酶发展较快,将成为一种很有前途的生化产物。 SOD是一种广泛存于动物、植物和微生物的生物酶,国外药用SOD系从血中提取,国内SOD已开发的品种已超过20种,证明我国对SOD的研究和应用已进入新时期。 我国从牛、马、猪、鸡、狗等动物血中提取SOD来源丰富,成本低,提取和纯化较方便,药细胞膜易破,用常规分离纯化法可获得高纯度的SOD。 本技术采用热变性,超滤新技术,不仅大大简化了工艺过程,而且产品质量和收率都比老工艺有较大的提高,其提取的SOD均为CuZu-SOD。 一、药品与仪器: (1)柠檬酸三钠:Na3C6H6O7(2)工业丙酮CaH6O (3)邻苯本酚(4)酸磷钾K3Poe4 (5)弱碱性阴离子交换剂DEAESephadsxa-50外观40-120ubrd或者DEAE-cell-ujose(DE-32)二乙基纤维素。(6)冷冻干燥器(自己组配) (7)层折柱(*30cm)(8)离心机 以上试剂及其它药剂、仪器可在各省市化学试剂商店、医疗器械商店购买。 二、Cu、Zu-SOD的提取及纯化(牛、马血为例) 1、工业流程: 加抗凝剂盐洗 鲜牛血--------------------->红血球------------------------> 离心除黄色血浆加NaCL热变性1热变性2 压积红细胞-------------->淡黄色混合液---------------------> 68度30分钟60-65度20分钟加丙酮 加丙酮层析 浅蓝色清液----------->絮状沉淀-------------->沉淀------------>冻干透析除盐 洗脱----------------->透析液--------->SOD(冻干品) 2、提取方法 (1)收集红细胞:鲜牛血100升,加入3. 8%柠檬酸三钠抗凝剂搅拌均匀,静置,使红细胞自然沉降,除去上层大部分血浆,下层液再离心除尽其余血浆,再加入3倍量%氯化钠(精制食盐)洗涤两次, 离心可收集到压积红细胞(40升)。 (2)热变性1:收集的红细胞再加入4公斤氯化钠,40克氯化铜,蒸馏水100升搅匀,水浴加热到68度恒温30分钟,迅速冷却加至室温,过滤除沉淀,收集滤液。 (3)热变性2:滤液在65度恒温水浴下,向滤液中慢慢中入40克氯化铜,至滤液清澈变为淡蓝色为止,保温20分钟,迅速冷却至室温,离心去沉淀得上清液。 (4)SOD粗品:超滤心清液加入倍全积的丙酮沉淀, 离心收集沉淀于离于水,离心除去不溶物得清液,清液加入倍体积的丙酮沉淀, 离心收集沉淀,沉淀经无水丙酮洗涤脱水两次,真空干燥得淡蓝色粉末状SOD粗品 (5)SOD粗品提纯:SOD粗品溶于,PH值磷酸钾缓冲液,将该混合液上在*30cm的层柱上,离子换剂为DEAE-SphadexA-50(该柱事先用缓冲平衡),以100~200ml小时速度上样,完毕后用同一缓冲A280mm值,低于然后用25~200mmolL,PH值磷酸钾缓冲液进行直线梯度分段洗脱,流速为100ml小时。用部分收集器收集, 洗脱液经透析除盐后,得浓缩的透析液,经冷冻干燥,得SOD成品,(呈浅绿色)。 三、SOD活性测定: SOD的测定方法很多,常见的有化学法,免疫法等电点聚焦法等,化学法测定的原理主要是利用有些化合物如邻苯三酚,在自氧化过程中会产生有色中间物降超氧游离基(O2)这样就可以利用SOD分例(O2)。阻止中间物的积累而测定其酶活性。 1、试剂及仪器 (1)邻苯本酚分析纯,用10mmolLECL配成50mmolL溶液。 (2)UV-754紫外分光光度计。 2、测定方法: (1)邻苯三酚自氧化速度的测定。 在25度、45ml`50mmolL、PH值、K2HPO4-KH2PO4缓冲液中加入10mmolL的邻苯三酚,迅速摇匀,倒入光径1cm的比色杯内,在325mm波长下每隔30秒测A值一次,要求自氧化速度控制在 左右。 (2)SOD或粗酶抽提液活性测定: 测定方法同测邻苯三酚自氧化速度,在加入邻苯三酚前加入待测SOD样液,测得数据按以下公式计算酶活性。-A325mmmin----------------------------------------*100%度 样液稀释倍数样液稀释倍数 酶活性(um1)=------------*反应液总体积*----------------50%样液体积 3、蛋白浓度(mgml)和蛋白的计算: SOD或粗酶抽提液,经280mm紫外比色测定后,查牛轿清白蛋的标准曲线,由此算出每ml含ug蛋白的量。 蛋白浓度=ug蛋白ml*样液稀释倍数*10负3次方=mg蛋白ml总蛋白=mg蛋白ml*原液总体积=mg蛋白。 4、比活(umg蛋白)的计算:单位活力(uml) 总活力 比活=-----------------------=-----------------=umg蛋白 蛋白的浓度(mg蛋白ml) 总蛋白 四、Cu、Zn-SOD性质: 1、Cu、Z n-SOD呈蓝绿色,分子量在3200左右,由两个中一个Cu和一个Zn。 2、对热稳定,天然牛血SOD,75度下加热数分钟其酶活丧失很小。 3、PH值对SOD的影响,SOD在~范围内,其催化速度不受影响,时SODZn脱落95%,PH12SOD构象发生不可递的构象,导致酶活性丧失。 4、SOD的紫外线吸收特征:SOD在280mm处没有吸收高峰。 5、金属辅其与酶活性。SOD属金属酶Zn仅于分子结构有关,而Cu与催化活性有关。 6、SOD是其具有还有和失活作用的。 五、药品与仪器: 柠檬三钠,分析纯:江苏花桥北工四厂; 工业丙酮:上海溶剂厂; 邻苯三酚,分析纯:贵州遵义化工厂; 六、SOD的包销单位: (1)河南郑州国营圣科研究所郑州南阳路14号邮编:450053《河南科技报》91年10月3日 (2)四川省金堂县工艺制品技校生化科接待室:金堂准口执行的院内,政府办公大楼1楼邮编:610404联系人:邓勇彭丽《四川农村报》91年3月1日 (3)广东省深圳市上步区石夏东二苍14号科技所邮编:518031联系人:黄秋林《科技消息报》92年7月10日 说明:1、资料后附的产品销售地址信息均为我们从近两年的报刊上摘录的各单位广告,并注明有出处。 2、你先看完资料后,行根据自己的实际情况,先小量试验, 并事先联系好产品的收购单位,待取得经验后再批量生产。 3、读者在联系收购单位时,请一定事先去联系,并附上邮资, 待得到明确答复后再根据情况去人办理,千万不要冒然前往,以免造成不必要的经济负担。 4、原料及仪器各地经营原料店供应,广州市人民南路,上九路等地均有供应。 附:详细SOD收购信息 1、广西南宁市生物化学制药厂 地址:鲁班路1号 2、上海生物化学制药厂 地址:海主路513号 3、江苏徐州市生物化学药厂 地址:海沛路86号 4、山东兖州市生物化学制药厂 地址:肉联厂内 5、湖南常德生物化学制药厂 地址:肉联厂内 6、佛山市生物化学制药厂 地址:佛山市 7、广州市明兴制药厂 地址:广州市河南路工业大道北48号 8、广州市白云制药厂 地址:从广州越绣公园坐21路车到三元里北展下车沿着矿泉别墅侧入200米 9、哈尔滨生化药厂哈肉联厂 地址:哈尔滨道外南极街12号院;电话:88423转制药厂 10、沈阳市生物化学制药厂 地址:哈尔滨皇姑区明廉路2号; 11、江苏省南京生物制药厂 地址:江苏省南京市下关区宝塔桥附近; 12、浙江省金华生物化学制药厂 地址:浙江省金华市河盘桥路51号 13、广东生物制药厂 地址:广州市三元里 14、广东汕头市生物化学制药厂 地址:湖山路西巷3号2号;电话:666124 11、江苏省南京生物制药厂 地址:江苏省南京市下关区宝塔桥附近 12、浙江省金华生物化学制药厂 地址:浙江省金华市河盘桥路51号 13、广东生物制药厂 地址:广州市三元里 14、广东汕头市生物化学制药厂 地址:湖山路西巷3号15.上海霞飞日用化工厂 16.北京丽源日用化工厂 17.南京化妆品厂 18.上海日用化学品二厂 19广州美容化妆品厂 20南京第二药物化学制药厂 上海永芳日用化学品厂 广州化妆品厂 杭州市凤喜化妆品厂 上海日用化学品四厂 天津市津乐制药厂 杭州第一生物化学制药厂 上海药物研究所实验药厂 天津市南开区美容化妆品厂 苏州市昊县生物化学厂 上海生物化学制药厂 天津生物医学技术开发中心 上海香海美容品厂 北京日用化学品四厂 武汉市辛安渡制药总厂 湖北沙市生化制药厂 北京市三露厂 注各大制药厂化妆品厂美容院均为销售对象 电话:,68212139 传真: 地址:北京市石景山区吴家村华电集团大楼三层 通讯:北京市石景山区40-021信箱 邮编:100040
昔日情今时伤
SOD的中文名称是超氧化物歧化酶,其英文名为Superoxidedimutase,分子量(牛血红细胞) 约 32000 是广泛存在生物体内的金属蛋白醇 , 别名有 : orgotein,ormetein,ontosein; ;Palosein等,SOD被科学家誉为21世纪最有发展前途的药用酶。 一、本工艺是从红细胞,肝和其它哺乳动物组织分离而得的金属酶;含两个亚基,每个亚基各含一个铜原子和一个锌原子,SOD可催化O2,歧化为H2O和O2, 其性质不仅仅取决于酶蛋白,而且还取决于活性部位的金属离子,按金属离子类型不同, 可分为和Fe--SOD,Mn--SOD三种.在一般条件下,SOD较稳定. 不同来源的 ,其紫外吸收光谱略有差异,如牛血SOD在258nm处显示最大吸收,而猪血SOD的最大吸收峰为265nm,在特定条件下,酶的活性可下降,甚至完全丧失, 如氰化物可抑制SOD活性,双氧水使SOD活性下降,氯化胍能明显抑制SOD活性等。 二、SOD用途主要是基于SOD是超氧阴离子清除剂,超氧阴离子(O2~)是人体内有毒物质,它能引起多种疾病,故能清除炎症过程中伴同产生的超氧离子, 而显示出强大的抗炎作用。 在医药工业:SOD可以治疗由于超氧离子引起的各种疾病,如糖尿病,白内障, 风湿性关节炎等,也是消炎的有效药物,而且还能抗衰老,抗肿瘤,抗辐射, 抗自身免疫疾病,现代研究表明:SOD还能治高血压,冠心病,胆囊炎,肺气肿等难治之症. 日用化学工业:由于SOD有防止细胞老化和解毒等功效, 因此在化妆品和护肤剂等工业产品中,添加SOD之后,具有防晒,祛斑,使皮肤柔嫩的作用.是目前化妆品行业中不可缺少的一种添加剂,国内及同行都已出现大量产品.食品工业:在食品添加剂加 SOD之后,增强营养,解除毒性,延长体内细胞寿命,国内已有SOD营养液产品, 并通过上海科研单位有关专家的鉴定。 三、SOD的开发前景:目前SOD在全国仅有少数科研单位及生化制药厂研究和开发本产品,而使用SOD产品厂家却日益增多,远不能满足市场需求 . 为鼓励和大力开发SOD新产品,国家已将其列入重点科技开发项目,并投放大批经费,现已获得成功, 开始向企业化生产转移,市场前景十分广阔。 四、注意事项:(1)我中心热忱欢迎社会各界朋友现场学习,由生化工程师向您授课,通过现场操作,指导,培训,使您尽快掌握该技术。(2)本工艺, 技术资料等不经我公司同意,不得擅自转让,翻印,销售给任何单位和个人,违者法律追究。 新法提炼技术 一、主要设备:(1)工业用离心机一台;(2)恒温水浴锅(10L--50L)(可自制)1台;(3)冰柜1台;(4)搅拌机1台;(5)玻璃器皿:1000ml,500ml烧杯各3只,50ml烧杯 2 只,50ml,500ml量杯各1个;(6)塑料桶若干个。 二、主要试剂:(工业纯度)柠檬酸钠,柠檬酸,葡萄糖,乙醇90%,氯仿,丙酮,氯化钠,磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,去离子水或蒸馏水,葡萄糖凝酸胶SephadexG-- 100 和DEAE--纤维素. 三、试剂的配制: 1.抗凝剂配方:(1)柠檬酸钠30g,柠檬酸10g葡萄糖 25g加水至1升,一般此种是每7ml血液,加1ml(抗凝剂).(2)40g升柠檬酸钠溶液:在1升水中加入克的氯化钠。 2.生理盐水:()在91克水中加入克的氯化钠。 3.磷酸盐缓冲溶液的配制:,磷酸盐缓冲溶液,一般用,35. 61 克升和 克升,前者加,后者加混合后即为PH= 缓冲溶液,如果用为升,为克升,仍是前者,后者混合后即得。 4.冷却剂:在本工艺中有使用-15度低温,一般用如下配方:用33克食盐加入100克雪或碎冰,以此比例配成混合体可达度。 四、工艺流程 (一)除血红蛋白 1.血液抗凝处理,在新鲜牛、马、猪血中迅速加入ACD1号抗凝剂,并缓慢搅匀,每7毫升血液中加入抗凝剂1毫升或2号抗凝剂。 2.把抗凝处理的血液放入离心机,以3000rmin离心约15--20分钟, 用吸管把上清液(黄色血清)小心吸去抛掉,下层的红血球用2--3倍生理盐水洗2--3次,在每一次洗涤中,用离心机以3000rmin离心,7--8分钟,反复操作后,得到洗涤血红细胞,洗涤后的血红细胞在-15度下冷冻可保存半年并不影响产率和比活,在血液量大, 处理不完时必须这样做。 3.在洗净的红血球中加入等体积去离子水,剧烈搅拌30分钟,使红血球细胞壁砍碎,以使其内的SOD浸出.最好在0--4度静止过夜后,把溶血进行有机提取。 4.接着向溶血中缓缓加入倍体积的预冷(-15度)95%乙醇和倍预冷氯仿,搅拌10--15分钟后,原溶血呈浆糊状,静止1--2小时,用滤布除去凝固的血红蛋白,然后将滤液2500rmin离心约1--5分钟留上清液抛去沉淀, 此时如果上清液略为微黄色时,可用快速过滤纸过滤,可得到微带蓝色的清澈透明的粗酶液。 (二)粗酶液的初步提纯: 1.丙酮提醇:向酶液中加倍量预冷(-15度 ) 丙酮 , 生成大量白色沉淀 , 以3000rmin离心2分钟收集沉淀,上清液可不必吸取,直接倾倒。 2.热变性:(除杂蛋白)准备好衡温浴锅,在本工艺中,提前30分钟, 注满水接通电源后,使之加热到55--60度以省时间,将沉淀量约50倍量体积比加入磷酸钠缓冲溶液,水浴加热至60度,15分钟后迅速冷却到室温.3000rmin离心2 分钟得上清液,在上清液中,缓缓滴加倍体积的预冷(-15度)丙酮,生成白色沉淀。 3.初纯SOD:在上述沉淀中加去离子水,制成20--30%SOD溶液,分装入样品瓶中,放入冷冻干燥机中,于开机后以真空度,约小时, 得到化妆或食品用SOD,该产品比活大于3000umg,外观呈微带蓝色的白色冻干品。 (三)SOD进一步提纯: SOD精品一般是把SOD产品经过柱层析,柱层析后的SOD没有小分子等杂质, 层析后为高活性的SOD大分子.SOD精品价格更高,它主要作为生物化学试剂, 化验室标准试剂试用.目前SOD柱层析有两种,二者可单独使用,也可结合使用,一般是DEAE-- 纤维素层析和SephadcxG--100葡聚糖凝胶层析,将(二)2,热变性后SOD丙酮沉淀用,缓冲溶液溶解,有不溶的杂蛋白时.离心抛去沉淀,上清液上DEAE--纤维素或SephadsxG--100层析柱(1*20cm或*30cm),梯度洗脱 , 洗脱液为,,NaH2PO4--NaHPO4缓冲液,下流速度控制在,在分光光度计上用紫外谱325nm处测流出液,合并活力峰,再用蒸馏水反复透析,透析彻底后, 放入样品皿置于冷冻干燥机中干燥后即得SOD精品。 五、注意事项: 1.掌握适当的温度和时间:虽然SOD对热较稳定, 但在分离纯化过程中最好还是采用较低温度,一般以0--10度为宜,时间长不要超过3天。 2.注意提取,提纯方法:使用有机溶剂或者加热均能有效沉淀蛋白质, 但掌握适当溶剂和加热结合的办法可以达到最佳效果。 六、SOD的检测方法:活性检验,比较方便的办法是用连笨三酚自氧化法, 先测得连笨三酚的自氧化速率,然后加入SOD再测得加入SOD之后的氧化速率,按照酶活性单位定义,即在最佳条件下,每分钟抑制连笨三酚自氧化分解速率达50% 的酶量定义为一个酶单位.依次求出活力总值 ,同时也可以用聚丙烯酰胺凝胶电泳来测定其纯度,看其分子量32000左右的一条带是否与有关文献指导一致. 超氧化物岐化酶(superoxide dimutase 简称SOD)是一种重要的氧自由基清除剂,作为一种药用酶,引起国内外生化届和医药届的极大关注。SOD应用于医学临床上可以治疗多种疾病,类风湿性关节炎、心肌梗塞等,在防辐射,抗衰老,抗肿瘤等方面也有积极的作用,而且广泛用于化妆品和食品添加剂的行列。 自1969年Mccord和Fridovich 首次发现从牛血细胞中发现超氧化物岐化以来,到目前为止,国内已有几十家科研单位对SOD作了大量的研究和试产工作,而且有些已批量生产。SOD引起了国内生化界的重视,1988年在浙江宁波如开了《全国首届SOD学术会议》。1989年4月在河南开封《第三届药用酶学术会议》上,SOD被列为重点开发项目,90年7月在大连《全国第二届SOD学术会议》,SOD已作为一种药用酶发展较快,将成为一种很有前途的生化产物。 SOD是一种广泛存于动物、植物和微生物的生物酶,国外药用SOD系从血中提取,国内SOD已开发的品种已超过20种,证明我国对SOD的研究和应用已进入新时期。 我国从牛、马、猪、鸡、狗等动物血中提取SOD来源丰富,成本低,提取和纯化较方便,药细胞膜易破,用常规分离纯化法可获得高纯度的SOD。 本技术采用热变性,超滤新技术,不仅大大简化了工艺过程,而且产品质量和收率都比老工艺有较大的提高,其提取的SOD均为CuZu-SOD。 一、药品与仪器: (1)柠檬酸三钠:Na3C6H6O7(2)工业丙酮CaH6O (3)邻苯本酚(4)酸磷钾K3Poe4 (5)弱碱性阴离子交换剂DEAESephadsxa-50外观40-120ubrd或者DEAE-cell-ujose(DE-32)二乙基纤维素。(6)冷冻干燥器(自己组配) (7)层折柱(*30cm)(8)离心机 以上试剂及其它药剂、仪器可在各省市化学试剂商店、医疗器械商店购买。 二、Cu、Zu-SOD的提取及纯化(牛、马血为例) 1、工业流程: 加抗凝剂盐洗 鲜牛血--------------------->红血球------------------------> 离心除黄色血浆加NaCL热变性1热变性2 压积红细胞-------------->淡黄色混合液---------------------> 68度30分钟60-65度20分钟加丙酮 加丙酮层析 浅蓝色清液----------->絮状沉淀-------------->沉淀------------>冻干透析除盐 洗脱----------------->透析液--------->SOD(冻干品) 2、提取方法 (1)收集红细胞:鲜牛血100升,加入3. 8%柠檬酸三钠抗凝剂搅拌均匀,静置,使红细胞自然沉降,除去上层大部分血浆,下层液再离心除尽其余血浆,再加入3倍量%氯化钠(精制食盐)洗涤两次, 离心可收集到压积红细胞(40升)。 (2)热变性1:收集的红细胞再加入4公斤氯化钠,40克氯化铜,蒸馏水100升搅匀,水浴加热到68度恒温30分钟,迅速冷却加至室温,过滤除沉淀,收集滤液。 (3)热变性2:滤液在65度恒温水浴下,向滤液中慢慢中入40克氯化铜,至滤液清澈变为淡蓝色为止,保温20分钟,迅速冷却至室温,离心去沉淀得上清液。 (4)SOD粗品:超滤心清液加入倍全积的丙酮沉淀, 离心收集沉淀于离于水,离心除去不溶物得清液,清液加入倍体积的丙酮沉淀, 离心收集沉淀,沉淀经无水丙酮洗涤脱水两次,真空干燥得淡蓝色粉末状SOD粗品 (5)SOD粗品提纯:SOD粗品溶于,PH值磷酸钾缓冲液,将该混合液上在*30cm的层柱上,离子换剂为DEAE-SphadexA-50(该柱事先用缓冲平衡),以100~200ml小时速度上样,完毕后用同一缓冲A280mm值,低于然后用25~200mmolL,PH值磷酸钾缓冲液进行直线梯度分段洗脱,流速为100ml小时。用部分收集器收集, 洗脱液经透析除盐后,得浓缩的透析液,经冷冻干燥,得SOD成品,(呈浅绿色)。 三、SOD活性测定: SOD的测定方法很多,常见的有化学法,免疫法等电点聚焦法等,化学法测定的原理主要是利用有些化合物如邻苯三酚,在自氧化过程中会产生有色中间物降超氧游离基(O2)这样就可以利用SOD分例(O2)。阻止中间物的积累而测定其酶活性。 1、试剂及仪器 (1)邻苯本酚分析纯,用10mmolLECL配成50mmolL溶液。 (2)UV-754紫外分光光度计。 2、测定方法: (1)邻苯三酚自氧化速度的测定。 在25度、45ml`50mmolL、PH值、K2HPO4-KH2PO4缓冲液中加入10mmolL的邻苯三酚,迅速摇匀,倒入光径1cm的比色杯内,在325mm波长下每隔30秒测A值一次,要求自氧化速度控制在 左右。 (2)SOD或粗酶抽提液活性测定: 测定方法同测邻苯三酚自氧化速度,在加入邻苯三酚前加入待测SOD样液,测得数据按以下公式计算酶活性。-A325mmmin----------------------------------------*100%度 样液稀释倍数样液稀释倍数 酶活性(um1)=------------*反应液总体积*----------------50%样液体积 3、蛋白浓度(mgml)和蛋白的计算: SOD或粗酶抽提液,经280mm紫外比色测定后,查牛轿清白蛋的标准曲线,由此算出每ml含ug蛋白的量。 蛋白浓度=ug蛋白ml*样液稀释倍数*10负3次方=mg蛋白ml总蛋白=mg蛋白ml*原液总体积=mg蛋白。 4、比活(umg蛋白)的计算:单位活力(uml) 总活力 比活=-----------------------=-----------------=umg蛋白 蛋白的浓度(mg蛋白ml) 总蛋白 四、Cu、Zn-SOD性质: 1、Cu、Z n-SOD呈蓝绿色,分子量在3200左右,由两个中一个Cu和一个Zn。 2、对热稳定,天然牛血SOD,75度下加热数分钟其酶活丧失很小。 3、PH值对SOD的影响,SOD在~范围内,其催化速度不受影响,时SODZn脱落95%,PH12SOD构象发生不可递的构象,导致酶活性丧失。 4、SOD的紫外线吸收特征:SOD在280mm处没有吸收高峰。 5、金属辅其与酶活性。SOD属金属酶Zn仅于分子结构有关,而Cu与催化活性有关。 6、SOD是其具有还有和失活作用的。 五、药品与仪器: 柠檬三钠,分析纯:江苏花桥北工四厂; 工业丙酮:上海溶剂厂; 邻苯三酚,分析纯:贵州遵义化工厂; 六、SOD的包销单位: (1)河南郑州国营圣科研究所郑州南阳路14号邮编:450053《河南科技报》91年10月3日 (2)四川省金堂县工艺制品技校生化科接待室:金堂准口执行的院内,政府办公大楼1楼邮编:610404联系人:邓勇彭丽《四川农村报》91年3月1日 (3)广东省深圳市上步区石夏东二苍14号科技所邮编:518031联系人:黄秋林《科技消息报》92年7月10日 说明:1、资料后附的产品销售地址信息均为我们从近两年的报刊上摘录的各单位广告,并注明有出处。 2、你先看完资料后,行根据自己的实际情况,先小量试验, 并事先联系好产品的收购单位,待取得经验后再批量生产。 3、读者在联系收购单位时,请一定事先去联系,并附上邮资, 待得到明确答复后再根据情况去人办理,千万不要冒然前往,以免造成不必要的经济负担。 4、原料及仪器各地经营原料店供应,广州市人民南路,上九路等地均有供应。
相伴久易知心
超氧化物歧化酶( SOD )又称过氧化物歧化酶。 SOD 属于金属酶,按照结合金属离子种类不同,该酶有以下三种:含铜与锌超氧化物歧化酶( CUZNSOD )、含锰超氧化物歧化酶( MN —— SOD )和含铁超氧化物歧化酶( Fe —— SOD )。三种 SOD 都催化超氧化物阴离子自由基歧化为过氧化氢与氧气。 目前,人们认为自由基(也称游离基)与大部分疾病以及人体的衰老有关。所谓的自由基就是当机体进行代谢时,能夺去氧的一个电子,这样这个氧原子就变成自由基自由基很不稳定,它要在身体组织细胞的分子中再夺取电子来使自己配对,当细胞分子推陈出新动一个电子后,它也变成自由基,又要去抢夺细胞膜或或细胞核分子中的电子,这样又称会产生新的自由基。如,超氧化物阴离子自由基、羟自由基、氢自由基和甲基自由基,等等。在细胞由于自由基非常活泼,化学反应性极强,参与一系列的连锁反应,能引起细胞生物膜上的脂质过氧化,破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联,使体内的许多酶及激素失去生物活性,机体的免疫能力、神经反射能力、运动能力等系统活力降低,同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等,最终使机体发生病变。因此,自由基作为人体垃圾,能够促使某些疾病的发生和机体的衰老。 人体内的自由基虽然自由基会对机体产生诸多危害,但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系,它们有的属于抗氧化酶类,有的属于抗氧化剂。像 SOD 是一种主要的抗氧化酶,能清除超氧化物自由基,在防御氧的毒性、抑制老年疾病以及预防衰老等方面起着重要作用。 SOD 能专一地清除体内有害的自由基,以解除自由基氧化体内的某些组成成分而造成的机体损害。如氧中毒、急性炎症、水肿、自身免疫性疾病、辐射病等疾病都与活性氧的毒性有关。实验证明, SOD 能够清除自由基,因此可消除上述疾病的病因。此解毒反应过程是两步: 第一步是,作为有害物质的超氧阴离子在 SOD 的作用下和氢离子反应,生成另一种物质——过氧化氢;第二步是,过氧化氢又在过氧化氢酶的作用下和氢离反应,最终生成了一种对人体无害的物质——水。 在体内,此第一步反应所生成的过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶体系给予清除,因而作为治疗手段的药用 SOD 如与过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶合并使用,其治疗效果将更好。 超氧化物歧化酶( SOD )作为超氧阴离子的整合剂,它既是目前临床上常用的治疗药物,可以制成 SOD 胶囊。例如赛凡 SOD 胶囊,能有效的俘获自由基,抵御自由基对机体蛋白质的破坏,从而导致老年常发的三高病发症。超氧化物岐化酶的临床应用 临床试用 SOD 治疗和预防下列疾病: ( 1 )可抑制心脑血管疾病:机体的衰老与体内氧自由基的产生与积累密切相关, SOD 可清除人体内过多的有害的氧自由,是对健康的有益的功效成分。具有调节血脂的保健作用,可预防动脉粥样硬化,预防高血脂引起的心脑血管疾病。降低脂质过氧化物的含量。 ( 2 )抗衰老作用: 年龄的增长和某些体外因素会造成机体和皮肤组织自由基产生超过机体正常清除自由基的的能力,从而使皮肤组织造成伤害,导致衰老。由于 SOD 能够清除自由基,因而可以延缓衰老。 ( 3 )自身免疫性疾病: SOD 对各类自身免疫性疾病都有一定的疗效。如红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎等。对于类风湿关节炎患者应在急性期病变未形成前使用,疗效较好。 ( 4 )肺气肿:肺气肿患者亦可使用 SOD ,但应在病变初期肺弹性纤维尚未受到损害时使用,疗效较好。 ( 5 )辐射病及辐射防护:本品可用来治疗因放疗引起的膀胱炎、皮肌炎、红斑狼疮及白细胞减少等疾病,对有可能受到电离辐射的人员,也可注射 SOD 作为预防措施。 ( 6 )老年性白内障: 对这类疾病应在进入老年期前即开始经常服用抗氧化剂,或者说经常注射 SOD 。如果一旦形成白内障,则除摘除外,用 SOD 治疗无效。
走在时尚最尖端
师资力量雄厚。学院拥有四川省政府督学1人、全国名师5人、省市特级教师6人、市级以上骨干教师56人,副高职称以上人数243人、硕博学历(学位)147人,领衔开设有成都市名校长工作室、名师工作室5个。专业设置科学。学院结合成都产业发展,设置有机电工程系、交通运输系、车辆工程系、物流工程系等8个系。在高职层次已开设物流管理、报关与国际货运、机械制造与自动化、铁道车辆、铁道信号、铁道交通运营管理、铁道工程技术、建筑工程技术、汽车整形技术、汽车检测与维修、楼宇自动化技术、会计、保险、建筑装饰工程技术、工业机器人、焊接技术、城市轨道交通运营管理、汽车装配与制造技术、移动应用开发19个专业,为区域经济发展培养二产类急需的高端技术技能型人才;在中职层次开设了汽车检测与维修、会计电算化、机电一体化、数控、模具、工程机械等专业,培养企业一线工作的高素质劳动者和中、初级专门人才。学院围绕成都产业发展规划,将按“产业+专业集群”的思路,拟建现代物流专业、装备制造专业、轨道交通专业、汽车工程专业、建筑工程专业等7大专业集群。实训条件一流。学院现建有现代物流专业、装备制造专业、轨道交通专业、汽车工程专业、建筑工程专业等7大综合实训基地,包括物流4D实训室、德国威斯巴登职业培训中心、奔驰培训中心、奥地利成都国际标准焊接高级培训中心在内的等114个实训室(中心),总面积4万多平米,设备实施总值亿元,工位数7千多个,能同时开展数百个职业技能培训。产教深度融合。学院与中外运敦豪、中国中车、航利集团、成都地铁有限责任公司、中铁二局、中铁八局、中铁二十三局、一汽大众、上汽集团、沃尔沃成都制造厂、成都飞机工业有限公司、中国电建集团(成都铁塔厂)、新加坡宝利根(成都)模具公司、吉利集团成都高原汽车、成都伟创力公司等200余家大型企业、跨国企业建立了良好合作关系,在专业建设、教学标准、科研、学生实习与就业等方面开展深度合作,为社会培养了数十万技术技能人才。 国际化办学。实施中澳TAFE学院、中德BASF、中英IMI、中奥WIFI等11项国际合作项目,开展合作办学、国际资格认证、游学交流等工作,培养具国际就业竞争力的高端技能型人才。重点推进中德(成都)AHK项目、CDBB物流项目、戴姆勒铸星教育计划、威斯巴登现代职教培训中心、DMG现代制造中心等“德国合作项目”,打造“中德创新平台”。集团化办学。以高职引领中职,牵头领办成都市现代物流、汽车、建筑、财经商贸等4个专业职教集团,纳入区域内学校62所、企业和行业协会90家、学生40000人,托管蒲江职中和金堂职中,领办成都市青苏职业中学、成都市建筑职业技术学校等学校,形成了“以城带乡、城乡一体”的办学格局。学院现为全国职业教育先进单位、全国重点建设职教师资培养培训基地、全国首批物流职业教育人才培养基地、全国汽车行业骨干学校、四川省博士后创新实践基地、成都市国际化示范窗口学校、成都市引进国外智力成果示范单位、成都市国际化人才实训基地。 成都工业职业技术学院先后投资1亿多元人民币,按照国际和国内一流标准建设,建成28个具有国际水准的实训基地,拥有焊接、威斯巴登中心、巴斯夫中心、物流、汽车、建筑、轨道交通、机械加工、会计电算化、电气、化工、计算机网络、楼宇智能化等实训基地。其中液压实验室是成都市重点实验室。拥有包括世界顶级设备马扎克9轴5联动加工中心在内的一大批先进设备设施。成都工业职业技术学院分别与美国、英国、德国、奥地利、澳大利亚、新加坡建立广泛的联系,开展实质性合作。合作的项目有:成都威斯巴登培训中心、成都奥地利焊接中心、德国巴斯夫(西南)培训中心、英国汽车工业协会IMI认证、美国马立可项目、德国BOSCH合作项目、澳大利亚成都TAFE学院等。省委、省政府表彰的教育系统先进集体全国职业教育先进单位首批国家改革发展示范学校全国创建和谐校园先进单位全国首批物流职业教育人才培养基地全国汽车行业骨干学校教育部关工委定点联系学校教育部职成司团支部联系基层学校一、建筑工程技术专业(一)专业培养目标本专业培养适应社会主义现代化建设需要,具备建筑工程技术专业必需的文化基础与专业理论知识,懂施工、会管理,从事建筑工程施工技术与管理、质量管理、安全管理等方面的高端技术技能复合型人才。(二)主要开设课程计算机应用基础、建筑制图与识图、房屋建筑学、建筑材料、建筑力学、混凝土与砌体结构、钢结构制作与安装、土力学与地基基础、建筑CAD、建筑工程测量、建筑施工技术、建筑施工组织、建筑设备工程、建筑工程经济、建设法规概论、高层建筑施工、建筑工程预算、建筑工程质量检查与验收、工程项目管理。(三)专业技术证书施工员(中级)、质检员(中级)、安全员(中级)、材料员(中级)、试验员(中级)、测量员(中级)(四)专业就业方向毕业生主要在建筑施工企业、建材生产加工企业、房地产开发公司、监理公司、甲方基建部门、结构设计事务所等企事业单位从事工程项目组织、现场施工管理、质量验收、施工安全、材料检测、技术资料及工程造价等方面的技术工作与管理工作。二、铁道工程技术专业(一)专业培养目标培养德、智、体等全面发展,具有全面素质和综合职业能力,面向生产第一线从事铁路工程施工、维护等专业技术工作的高素质、技能型人才。(二)主要开设课程计算机应用基础、《工程制图》、《工程CAD》、《土木工程材料试验》、《岩土分析与试验》、《工程测量》、《土力学与地基基础》、《铁路路基工程施工》、《铁路轨道构造与施工》、《铁路线路检测》、《铁路桥隧施工与养护》、《铁路线路修理》、《钢轨探伤》、《大型机械化养路作业》、《高速铁路施工技术》等课程。(三)专业技术证书材料试验工(中级)、土工试验工(中级)、测量中级工(中级)、线路工(中级)。(四)专业就业方向主要面向铁道交通部门的基层单位,如中国铁道工程各工程局、工程质量检测公司、铁路工程施工监理咨询公司、铁总公司各铁路局、地方铁路公司、城市地铁公司等。 一、会计专业(一)专业培养目标培养具备从事企事业单位会计、会计核算、财务管理、项目预决算、内部控制和其他经济管理工作的具有中高级技术技能等级的应用型人才。(二)主要开设课程经济学基础、高等数学、基础会计、审计原理、管理学原理、经济法基础、财经法规与会计职业道德、财务会计、税法等。(三)会计专业证书序号学生需掌握的技能技能证书名称1计算机操作技能省高校计算机等级考试一级2会计从业技能省财政厅会计从业资格证书3审计从业资格省审计局审计从业资格证4会计电算化省财政厅会计电算化初级证书5大学英语大学英语应用能力B级证书6初级职称助理会计师证书、助理审计师证书7行业证书用友ERP网络工程(四)就业方向企事业单位会计、财务管理、内部审计、信息采集与处理、数据分析、行政管理等岗位。(五)合作单位普华永道、用友股份、亚洲会计师事务所、众信财务、江西中投、武侯国税、高新国税、深圳神州通等 一、铁道车辆专业(一)专业背景随着我国经济的不断迅速发展,对交通运输的需求越来越大,要求越来越高。其中高速铁路、客运专线、城际铁路、城市地铁、城市轻轨等轨道交通以运能大、能耗小、价格低、速度快而获大力发展。按照《国家综合交通网中长期发展规划》和《成都市综合交通运输“十二五”发展规划》,成都将建设和强化全国第五大铁路枢纽,打造“二环十射”铁路网及“一环七射”市域快铁网,初步实现成都至周边城市的半小时快铁交通圈,至重庆的1小时快铁交通圈,至周边省会城市的4小时快铁交通圈和至京津冀、珠三角、长三角的8小时快铁交通圈,基本建成承接华南华中、连接西南西北、沟通中亚南亚的西部铁路交通运输枢纽,建成成都铁路动车检修段、成都铁路客运专线综合维修段和成都和谐型大功率机车检修段,进一步巩固和提升成都的铁路枢纽作用。成都的高速铁路正在加速发展,预计在2015年成都的高速铁路总里程将达到5000公里,总共有12条高速铁路和快速铁路。同时,成都市目前正在积极发展城市轨道交通,大力规划和建设地铁、轻轨,以解决日益紧张的城市交通问题。届时,将需要大量的专业技术人员来运营和维护铁道车辆。(二)专业培养目标培养拥护党的基本路线,德、智、体、美全面发展,掌握铁道车辆的总体结构、控制技术、制动技术和车辆机电设备技术,具有车辆运行维护、检测维修和技术创新能力的面向国铁、高铁、城际铁路、城市地铁等轨道交通运营第一线的高技能、高素质型的技术应用型人才。(三)主要开设课程1、专业基础课:机械制图与CAD、公差配合与技术测量、机械设计基础、工程力学、电工电子技术、微机原理与接口技术、PLC控制技术、液压与气压传动、有限元分析;2、专业核心课:铁道概论、车辆制动装置、车辆构造与检修、车辆检修工艺、客车电气装置、客车空调装置、城市轨道交通车辆电气控制、城市轨道交通车辆牵引传动、车辆动力学基础、动车组运用与检修、城市轨道交通车辆牵引计算、动车组车内设备及游客信息系统;3、专业实践:车辆钳工实训、电工电子实训、动车组与城轨车辆认知实训、普通铁道车辆认知实训、车辆制动装置实训、车辆走行部实训、车辆电气与空调实训、顶岗实习和毕业设计;(四)主要推荐就业企业本专业毕业生就业主要面向铁路局、地铁公司等轨道交通车辆营运企业,在其车辆段或动车所从事轨道交通车辆的维护、维修、运营与管理等工作。1、初始岗位:轨道车辆维修人员、轨道车辆维护管理人员、初级电动列车电气技术人员、初级电动列车机械技术人员;2、发展岗位:轨道车辆维修技师、中(高)级轨道车辆维护管理人员、中(高)级电动列车电气技术人员、中(高)级电动列车机械技术人员。主要合作单位:成都铁路局、成都地铁有限责任公司、成都南车集团。二、机械制造与自动化专业(一)主干课程:机械制图、单片机原理与微机接口技术、金属材料及热处理、工程制图基础、工程力学、机械设计、电工电子技术、液压与气动传动、C语言程序设计、计算机辅助设计与制造(CADCAMCAPP)、数控技术、机械制造工艺学、数控编程与操作、可编程逻辑控制器(PLC)、现代制造技术等 。(二)就业方向:掌握现代化机械制造及自动化专业的基本理论及操作技能,能从事机械加工及通用设备、数控设备的安装、使用、维护、管理,适用于机械制造行业生产第一线需要的专科学历层次的高端技能型人才。(三)合作单位:一汽集团成都公司、新加坡宝利根(成都)精密模塑有限公司、中国南车集团、成都飞机工业(集团)、成都锦江电器制造有限公司、成都伟创力机械制造有限公司等。 一、铁道通信信号专业(一)专业背景铁道通信信号专业是铁路(高铁及城市轨道交通)的特有专业之一,是保证行车安全,提高铁路行车速度和效率的自动控制和远程控制系统。根据铁路《中长期铁路网规划》,到2020年,全国铁路营业里程将达到12万公里以上。其中建设客运专线万公里以上,西部铁路营业里程将达到5万公里以上。同时我国城市轨道交通已进入快速发展时期,共有30多个城市轨道交通建设规划获批,预计至2020年,我国城市轨道交通累计营业里程将达到7395公里。四川要建设西部交通枢纽,成都市要大力发展轨道交通,都需要大量的铁道通信信号专业人才。(二)培养目标培养能从事铁路(高铁)及城市轨道交通通信信号设备的设计、维护维修、施工调试、系统故障分析处理和业务管理的专业应用型人才。(三)主要课程1.专业基础课:电路基础、AutoCAD、模拟(数字)电子技术、微机原理、通信原理。2.专业拓展课程:信号基础、信号测量、信号电源、专业英语、计算机网络、C语言。3.核心专业课程:车站信号自动控制、区间信号自动控制、驼峰信号自动控制、工程设计与施工、列车运行自动控制、调度指挥与调度集中。(四)主要推荐就业企业:成都铁路局、铁道第二勘测设计院、四川省铁路集团有限责任公司、成都地铁公司、无锡地铁公司、中铁二局集团、中铁八局集团等。二、铁道交通运营管理专业(一)培养目标:主要培养德、智、体,各方面全面发展,掌握本专业所必需的基本理论和专业知识,有较高的综合素质和较强的铁道交通运营管理的专业技能,能从事铁路运输、地面轨道交通及其它相关企业的运输生产、经营管理与服务工作的高级管理型人才和复合型工程技术工作者。(二)主要课程:1. 知识结构(1)专业基础课机车车辆及牵引计算、线路站场、 铁道信号、工程制图基础、运筹学(2)专业主干课《铁路行车组织》、《铁路行车规章》、《《铁路客运组织》、《铁路货运组织》、《铁路旅客运输服务》、《铁路安全管理》以及到运输企业顶岗实习、校内综合技能训练等实践实训课程(三)就业方向:国家铁路运输企业, 地方铁路运输企业有专用铁道的国家大中型企业的运输管理部门城市轨道地面交通的运营部门及地下铁道港口铁路运输部门以及轮渡公司等。例如:成都铁路局、广州地铁公司、四川省铁路集团有限责任公司、成都地铁公司、重庆轨道公司、无锡地铁公司等。可以取得的证书:1、铁路初级客运员证;2、铁路中级客运员证;3、红十字会紧急救护员证;4、铁路中级连接员证;5、铁路中级货运员证;6、铁路中级调车员证。 一、汽车整形技术专业(一)主干课程:课程设置的原则1、以岗位工作任务进行专业课程设置。课程体系的构建必须贯彻“以就业为导向”的职教思想,以岗位工作任务进行专业课程设置,课程定位清楚,目标明确。2、结合调研和多次与企业专家共同研讨、分析,得出课程设置的逻辑主线:以岗位职业能力的上述工作流程为逻辑主线进行专业课程设置,按照汽车维修工中级、高级、二级技师的知识要求和技能要求,循序渐进设置项目课程。3、课程以项目课程为主,在坚持以岗位工作任务进行专业课程设置的前提下,可以将岗位工作任务进行分解,以带有典型性的汽车故障诊断为主线进行专业课程设置。主要核心课程:汽车文化汽车维修基础 汽车车身结构及附属设备 汽车涂装技术 汽车车身钣金修复技术 车身测量与校正 色彩与调色 汽车构造 汽车材料主要实践环节汽车车身钣金修复实训 汽车涂装训练 汽车色彩与调色(调色)实验 汽车喷绘 汽车车身结构及附属设备(拆装 )实验 毕业设计及答辩 顶岗实习(二)就业方向:1、就业领域:汽车维修、汽车美容、汽车销售和售后服务、汽车保险、二手机交易等相关职业领域。2、初始工作岗位:汽车钣金维修,汽车涂装修复、汽车美容、事故车查勘、二手车鉴定评估。相近工作岗位为汽车维修接待、汽车整车销售、汽车零配件销售与管理。3、可升迁的职业岗位:汽车钣金或涂装修复技术管理、汽车钣金或涂装技术生产管理、汽车钣金或涂装修复技术培训、汽车服务企业经营与管理。(三)合作企业:巴斯夫公司 奔驰公司、三和集团、申蓉集团、港宏集团、建国集团二、汽车检测与维修技术专业(一) 专业背景汽车检测与维修技术是全国技能紧缺人才培养重点专业,是保障正常汽车使用重要环节。随着我国汽车销售和保有的飞速发展,汽车服务从业人员的数量和素质日益受到重视。以汽车维修业为例,据中国汽车工业协会、慧聪研究统计数据表明,机动车维修企业(包括摩托车)万多户,其中一、二类企业约万家,从业人数达260万,年完成工作量2亿辆次,汽车维修行业的产值1000多亿元。单从维修从业人员的数量上看,目前约260万从业人员基本能满足2000万辆汽车维修业务的需求,但随着汽车保有量的急剧增加,轿车进入家庭步伐的加快,使得汽车维修行业的车源、车种、服务对象以及维修作业形式已发生变化。因此,一方面进一步提高汽车维修从业人员的素质,是解决好汽车维修行业能够为消费者提高更加方便、快捷、优质、价廉的汽车维修服务的首要任务;另一方面,随着汽车保有量的大幅度上升,维修及相关行业高素质从业人员不足的矛盾会更加突出,必须采取相应措施。(二)培养目标本专业培养拥护党的基本路线,德、智、体、美全面发展,掌握汽车构造、汽车诊断检测等专业知识,具有汽车等各类机动车的检测、运行、维修与技术管理等能力,适应现代汽车维修行业汽车技术服务的应用型人才。(三)主要课程1.专业基础课: 汽车概论、汽车维修基础、汽车电工电子技术、汽车材料2.核心专业课程:汽车发动机构造与维修、汽车电气构造与维修、汽车维护、汽车新能源技术、汽车传动系维修、汽车行驶转向系维修、汽车单片机技术、汽车故障诊断与排除。3、专业实践:汽车整车结构认识、汽车发动机拆装、汽车电气设备故障诊断实验实训、汽车发动机故障诊断实验实训、汽车变速器、制动、行驶、转向系统故障诊断实验实训毕业设计及答辩、顶岗实习(四)主要推荐就业企业:奔驰公司、三和集团、申蓉集团、港宏集团、建国集团 一、物流管理专业(一)主干课程物流概论、经济学概论、铁道概论、仓储与配送管理、运输管理、速递服务与管理、铁路货运组织、物流市场营销、客户服务等。(二)就业方向毕业生主要面向交通运输部门、现代商贸企业、邮政与速递行业、企业物流部门,从事物资采购与供应、运输与配送、库存控制与管理、仓储业务与管理、市场调研与开发、客户服务、商务谈判等具体工作。(三)合作单位招商局成都物流有限公司、成都一汽国际物流有限公司、中铁现代物流有限公司、申通快递有限公司、苏宁电器广汉物流基地、中外运敦豪(DHL)国际快件有限公司等。 一、楼宇智能化工程技术专业专业代码:560404(一)培养目标本专业培养具有良好的职业素养和道德观念,适应生产和管理第一线需要的德、智、体、美全面发展,面向建设等行业就业岗位,具备楼宇智能化工程技术专业必需的基础理论和专业技术,掌握楼宇电气工程、安防工程、楼宇自动化系统和楼宇设备运行管理等方面的专业知识,能胜任消防工程设计与施工、安防工程设计与施工、建筑电气工程设计与施工、智能化工程设计与施工、建筑设备监控系统管理与维护等岗位工作,能从事楼宇智能化系统集成、设计、安装、调试、工程管理的专科学历层次的高端技能型人才。(二)职业面向(包含电梯设备和楼宇智能化设备两个方向)本专业毕业生主要在建筑设备安装施工企业、建筑消防工程公司、安防工程公司、楼宇智能化系统集成公司、网络工程公司、房地产开发公司、造价咨询公司、建筑设计院、监理公司、物业管理公司、其他相关企事业单位工作。(三)可以获得证书(1)、维修电工证 中级(高级)(2)、电梯安装维修工 中级(高级)(3)、智能楼宇管理员 中级(高级)升迁岗位资格证书:(1) 注册建造师(2) 智能楼宇管理师(3) 注册电气工程师(四)主干课程(1)电工基础 (2)电子技术基础 (3)建筑设备CAD (4)安装工程制图与识图 (5)建筑电气控制与PLC (6)建筑供配电与照明技术 (7)火灾自动报警系统 (8)安全防范工程技术 (9) 建筑设备监控系统工程设计与施工 (10)电梯控制技术 (11)信息与网络系统 (12) 中央空调系统技术 一、建筑装饰工程技术(一) 专业背景:近20年来,我国建筑装饰行业发展迅速,年增长率将近20%,远远高于同时期GDP的增长速度。行业的从业者总量由2005年的1100万人增加到2010年的1500万人,增长幅度达到左右,“十二五”行业从业者队伍建设发展目标---到2015年,行业的从业者总数力争达到1800万人,比2010年增加300万人,增长幅度为20%。尤其是2002年以来,由于人民生活水平的提高和房地产开发投资及基础设施的强劲增长,使得成都市建筑装饰业取得了超常规的发展,建筑装饰行业从业者队伍不断扩大,需要大量的技能型人才来带动整个行业水平的提升。(二)培养目标:培养适应社会主义市场经济需要的德、智、体全面发展,具有良好职业道德,掌握建筑装饰工程技术专业专门理论知识,能从事建筑装饰工程设计、施工现场的技术管理和组织管理的能力,成为专业素质较强的综合性建筑装饰工程设计、施工和管理的高端的应用型人才。(三) 课程设置:1、专业基础课程:美术、构成、建筑装饰材料、装饰施工图识读与会审、建筑装饰史与作品欣赏、建筑装饰设备、工程项目管理等课程。2、专业核心课:程室内设计、室内软装饰设计、建筑装饰构造与施工、效果图制作、建筑装饰工程安全管理、建筑CAD、建筑装饰施工测量放线、建筑装饰施工组织、工程计量与成本管理等课程。3、 专业技能训练课程:专业认识实习、施工图识读实习、测量实习、住宅室内设计、公共建筑室内设计、建筑CAD大作业、施工组织设计、工程预算软件应用、美术实习、构成实习、效果图制作实习、专业技能实训、毕业顶岗综合实践。(四)就业方向:通过调研分析发现:企业中需要以下工作人员:主要在建筑装饰设计、施工企业从事建筑装饰工程设计(如设计助理、设计师) 、施工(如施工员、材料员、安全员、监理员)和技术管理(如质量员、标准员、造价员、资料员)等岗位工作。升职方向:计持设计师、主任设计师、设计总监、注册建造师、项目经理等就业单位:新空间装饰公司、家和装饰、瑞和居装饰公司、美家堂装饰有限公司、九正装饰有限公司等装饰公司。
一直孤单
超氧化物歧化酶( SOD )又称过氧化物歧化酶。 SOD 属于金属酶,按照结合金属离子种类不同,该酶有以下三种:含铜与锌超氧化物歧化酶( CUZNSOD )、含锰超氧化物歧化酶( MN —— SOD )和含铁超氧化物歧化酶( Fe —— SOD )。三种 SOD 都催化超氧化物阴离子自由基歧化为过氧化氢与氧气。 目前,人们认为自由基(也称游离基)与大部分疾病以及人体的衰老有关。所谓的自由基就是当机体进行代谢时,能夺去氧的一个电子,这样这个氧原子就变成自由基自由基很不稳定,它要在身体组织细胞的分子中再夺取电子来使自己配对,当细胞分子推陈出新动一个电子后,它也变成自由基,又要去抢夺细胞膜或或细胞核分子中的电子,这样又称会产生新的自由基。如,超氧化物阴离子自由基、羟自由基、氢自由基和甲基自由基,等等。在细胞由于自由基非常活泼,化学反应性极强,参与一系列的连锁反应,能引起细胞生物膜上的脂质过氧化,破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联,使体内的许多酶及激素失去生物活性,机体的免疫能力、神经反射能力、运动能力等系统活力降低,同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等,最终使机体发生病变。因此,自由基作为人体垃圾,能够促使某些疾病的发生和机体的衰老。 人体内的自由基虽然自由基会对机体产生诸多危害,但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系,它们有的属于抗氧化酶类,有的属于抗氧化剂。像 SOD 是一种主要的抗氧化酶,能清除超氧化物自由基,在防御氧的毒性、抑制老年疾病以及预防衰老等方面起着重要作用。 SOD 能专一地清除体内有害的自由基,以解除自由基氧化体内的某些组成成分而造成的机体损害。如氧中毒、急性炎症、水肿、自身免疫性疾病、辐射病等疾病都与活性氧的毒性有关。实验证明, SOD 能够清除自由基,因此可消除上述疾病的病因。此解毒反应过程是两步: 第一步是,作为有害物质的超氧阴离子在 SOD 的作用下和氢离子反应,生成另一种物质——过氧化氢;第二步是,过氧化氢又在过氧化氢酶的作用下和氢离反应,最终生成了一种对人体无害的物质——水。 在体内,此第一步反应所生成的过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶体系给予清除,因而作为治疗手段的药用 SOD 如与过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化氢酶合并使用,其治疗效果将更好。 超氧化物歧化酶( SOD )作为超氧阴离子的整合剂,它既是目前临床上常用的治疗药物,可以制成 SOD 胶囊。例如赛凡 SOD 胶囊,能有效的俘获自由基,抵御自由基对机体蛋白质的破坏,从而导致老年常发的三高病发症。超氧化物岐化酶的临床应用 临床试用 SOD 治疗和预防下列疾病: ( 1 )可抑制心脑血管疾病:机体的衰老与体内氧自由基的产生与积累密切相关, SOD 可清除人体内过多的有害的氧自由,是对健康的有益的功效成分。具有调节血脂的保健作用,可预防动脉粥样硬化,预防高血脂引起的心脑血管疾病。降低脂质过氧化物的含量。 ( 2 )抗衰老作用: 年龄的增长和某些体外因素会造成机体和皮肤组织自由基产生超过机体正常清除自由基的的能力,从而使皮肤组织造成伤害,导致衰老。由于 SOD 能够清除自由基,因而可以延缓衰老。 ( 3 )自身免疫性疾病: SOD 对各类自身免疫性疾病都有一定的疗效。如红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎等。对于类风湿关节炎患者应在急性期病变未形成前使用,疗效较好。 ( 4 )肺气肿:肺气肿患者亦可使用 SOD ,但应在病变初期肺弹性纤维尚未受到损害时使用,疗效较好。 ( 5 )辐射病及辐射防护:本品可用来治疗因放疗引起的膀胱炎、皮肌炎、红斑狼疮及白细胞减少等疾病,对有可能受到电离辐射的人员,也可注射 SOD 作为预防措施。 ( 6 )老年性白内障: 对这类疾病应在进入老年期前即开始经常服用抗氧化剂,或者说经常注射 SOD 。如果一旦形成白内障,则除摘除外,用 SOD 治疗无效。 参考资料: